http://mimnotes.info/ ru Портал о иммунологии DataLife Engine v.4.5 http://mimnotes.info/2008/03/10/issledovaniya_in_vivo.html В конце 60-х — начале 70-х гг. в большинстве работ, посвященных функ-ционированию макрофагов, использовалась модель иммуногенности макрофагов in vivo. Макрофаги инкубировали с радиоактивно меченным антигеном (например, с 1311-гемоцианином) и через разное время после инкубации вводили син-генным реципиентам, исследуя их способность индуцировать синтез антител [44, 45]. Часть макрофагов инкубировали in vitro, и через разное время определяли количество 1311-меченого антигена, остающегося в клетках или выделяемого в среду. Антигены вначале связывались с клеточной поверхностью, а затем поглощались в составе мембранных пузырьков и быстро подвергались катаболизму. Около 80% антигена, первоначально связавшегося с клеткой, деградировало; большая часть катаболизированного антигена позднее обнаруживалась в культуральной среде в виде 1311-аминокислот (табл. 5.6). В то же время оставшиеся 20% связанного клетками антигена избегали первоначальной дегра-дации и оставались ассоциированными с кле ...]]> Професор Mon, 10 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/10/issledovaniya_in_vivo.html http://mimnotes.info/2008/03/10/raspoznavanie_insulinov.html Бычий и бараний инсулины имеют совершенно одинаковую третичную структуру и различаются лишь одной аминокислотой (остаток 9 в А-цепи). Клоны индукторных клеток мыши, иммунизированной бычьим инсулином, активируются под действием бычьего, но не бараньего инсулина; клоны, полу-ченные от мышей, иммунизированных бараньим инсулином, обладают обратной специфичностью. Эти данные наряду с другими показывают, что индукторная Т-клетка может отличить ассоциированные с молекулой класса II белки, раз-личающиеся всего по одной аминокислоте [65].
Хотя ясно, что специфичность активации индукторных клонов исключи-тельно высока, значительно хуже доказано, что эти клоны синтезируют рас-творимые белки, способные различать два антигена, не связанные с молекулами класса II. Одной из причин, дающих основание подозревать, что такие индукторные молекулы могут играть роль в антиген-специфической стимуляции В-клеток, служат результаты исследования молекул, синтезируемых и, вероятно, секретируемых клонами ...]]> Професор Mon, 10 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/10/raspoznavanie_insulinov.html http://mimnotes.info/2008/03/08/antigennezavisimie_vzaimodeystviya.html Монослой макрофагов, полученных из различных лимфоидных органов или из перитонеального экссудата, связывает тимоциты в значительно большей степени, чем полиморфно-ядерные лейкоциты или фибробласты. Лимфоциты из лимфатических узлов или перитонеального экссудата прикрепляются к моно-слою макрофагов в значительно большем количестве, чем ксеногенные тимоциты или лимфоциты [68]. Таким образом, по-видимому, существует некоторая специфичность взаимодействия, возможно указывающая на существование неких клеточных механизмов распознавания. Не было обнаружено никакой избирательности по отношению к В- и Т-лимфоцитам: они связывались с макрофагами пропорционально их содержанию в популяции лимфоцитов. Изменение поверхностных lg В-лимфоцитов не подавляло связывания; не было обнаружено также конкурентного угнетения связывания избытком lg.

Для антигеннезависимого взаимодействия макрофагов с лимфоцитами тре-бовались живые макрофаги, в то время как роль лимфоцитов была настолько пасси ...]]> Професор Sat, 08 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/08/antigennezavisimie_vzaimodeystviya.html http://mimnotes.info/2008/03/08/issledovaniya_in_vitro.html Разработка воспроизводимых и надежных методов оценки антиген-специ-фической активации Т-клеток позволила провести аналогичные исследования in vitro. Как и раньше, поглощение белковых антигенов макрофагами определяли с помощью радиоактивных изотопов, а иммуногенность оценивали по способности инкубированных с антигеном макрофагов активировать пролифе-рацию иммунных Т-клеток in vitro. Хотя результаты исследований in vivo и in vitro в целом были сходны, обнаружился также и ряд отличий, частично изменивших наши представления о процессинге антигена в макрофагах.

Макрофаги, инкубированные с растворимыми белковыми антигенами in vitro, накапливали иммунологически активный антиген по двухступенчатому механизму [48]. Первый этап включал связывание молекул антигена с поверх-ностью макрофагов; этот этап не зависел от температуры. Потенциальная имму-ногенность молекул антигена, связавшихся с поверхностью макрофагов во вре-мя инкубации при 4° С, полностью подавлялась трипсинизацией ма ...]]> Професор Sat, 08 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/08/issledovaniya_in_vitro.html http://mimnotes.info/2008/03/07/izotipi_immunoglobulinov_lokalizovannih_na_poverhnosti_vkletok_pamyati.html Изотипы slg-дол гожи ву щи х клеток памяти были исследованы в нескольких лабораториях. Согласно общепринятому мнению, предшественником IgG-АОК среди долгоживущих примированных В-клеток является IgG-популяция [89]. Кроме того, sIgM+IgG+-nonyflH4HH клеток памяти может давать АОК, продуцирующие и IgM, и IgG [92]. Среди фенотипов Ig, обнаруженных в прими-рованных популяциях, имеется sIgD+; такие клетки, вероятно, несут также и поверхностные IgG [89, 90].В ряде экспериментов с длительно культивируемыми примированными клетками сравнивали способность определенного числа клеток давать вторичный IgM- или IgG-ответ. Данные, касающиеся относительного вклада каждой из субпопуляций в общий ответ, весьма разрозненны. Юан и др. [92] обнаружили, что две трети вторичного IgG-ответа определяются ^0+-клетками, а оставшаяся одна треть — клетками, несущими и IgM, и IgG, или клетками, имеющими на своей поверхности IgD. С помощью метода селезеночных колоний Тил и др. [57] показали, что примерно пол ...]]> Професор Fri, 07 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/07/izotipi_immunoglobulinov_lokalizovannih_na_poverhnosti_vkletok_pamyati.html http://mimnotes.info/2008/03/07/poverhnostnie_immunoglobulini.html Данные о взаимосвязи между slg и FcR противоречивы. Большинство имеющихся в литературе данных было получено в экспериментах, связанных с изучением кокэппинга slg и FcR. Часто кэппинг slg или образование выпуклых полосок slg («stripping») на поверхности мышиных лимфоцитов, вызываемых aHTH-Ig-антителами или их Р(аЬ)2-фрагментами, сопровождаются кокэп-пингом FcR [159]. Однако имеются и противоположные сообщения, согласно которым кэппинг slg, наблюдаемый после добавления анти-Ig, не изменяет диффузного характера распределения FcR [145, 146]. Это противоречие, вероятно, обусловлено количественными, а не качественными различиями, поскольку были описаны случаи выявления остаточных FcR в результате их неполного кэппинга. Так, Юнануе и Эббас [159] продемонстрировали наличие кокэппинга FcR с slg на поверхности лимфоцитов, используя интактные анти-х; с F (ab)2-анти-х кокэппинг был выражен в меньшей степени, хотя наличие некоторого кокэппинга было очевидным. Кроме того, Бает и др. [160] обнар ...]]> Професор Fri, 07 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/07/poverhnostnie_immunoglobulini.html http://mimnotes.info/2008/03/07/svyazivanie_antigena_tlimfotsitami.html Вместо трудоемких функциональных анализов специфичности Т-лимфоцитов для характеристики Т-клеточных рецепторов можно применить альтернативный подход, заключающийся в изучении связывания антигена Т-лимфоци-тами. В данном разделе мы опишем эксперименты, поставленные с целью про-демонстрировать связывание антигена Т-клетками; затем мы рассмотрим связы-вание антигена белками-продуктами Т-клеток.

Если бы было возможно продемонстрировать связывание антигена неболь-шой частью Т-лимфоцитов и при этом можно бы было показать, что Т-клетки, которые связывают антиген, также ответственны и за различные реакции Т-клеток на этот антиген, то у нас имелся бы способ характеристики специфичности связывания антигена Т-клетками. Этот подход был успешно использован для изучения В-клеток и помог установить, что антигенные рецепторы данной В-клетки неотличимы по своим антигенным свойствам и по способности связывать антиген от секретируемых той же клеткой иммуноглобулинов. Попытки продемо ...]]> Професор Fri, 07 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/07/svyazivanie_antigena_tlimfotsitami.html http://mimnotes.info/2008/03/05/t1antigeni.html С помощью метода адоптивного переноса было показано, что на Т1-анти-гены отвечают как sIgM+IgD ~- [82], так и sIgM+IgD +-клетки [83], Относительный вклад каждой субпопуляции зависит, вероятно, от иммунологической «предыстории» животного-донора, поскольку недавние исследования показали, что неспецифическая стимуляция может быстро изменять фенотип реагирующих клеток, превращая их из sIgM+IgD~ в sIgM+IgD+ [84]. В экспериментах in vitro было обнаружено, что даже при использовании В-клеток новорожденных животных, у которых большая часть этих клеток представлена субпопуляцией sIgM+IgD~, ответ в основном определяется sIgM+IgD-raeTKaMH [66, 83]. С другой стороны, применение метода лимитирующих разведений позволило заключить, что в ответе принимают участие как sIgM+IgD~-, так и sIgM+IgD+-cy6nony-ляции, хотя частота предшественников среди sIgM+IgD~-mieTOK ниже [85].

Таким образом, любой из способов определения позволяет наблюдать ответ sIgM+IgD+-raeTOK на TI-антигены. Что каса ...]]> Професор Wed, 05 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/05/t1antigeni.html http://mimnotes.info/2008/03/03/tolerantnost_oposredovannaya_retseptorom.html В-клетки новорожденных чрезвычайно чувствительны к индукции толе-рантности [96], а также к инактивации с помощью анти-ц-антител [97]. Эти наблюдения согласуются с гипотезой о том, что для приобретения устойчивости к индукции толерантности В-клетками, отвечающими на TD-антигены, необходима экспрессия slgD, поскольку появление slgD коррелирует с потерей чувстви-тельности к индукции толерантности [98]. В пользу этой теории свидетельствуют эксперименты, показавшие, что в результате удаления slgD либо гидролизом папаином [99], либо предварительной обработкой клеток анти-6-сыворот-кой (но не анти-р,) [100] зрелые В-клетки могут стать чувствительными к индукции толерантности. Наоборот, в других опытах, в которых исследовали вос-приимчивость к толерантности разделенных sIgD+-и slgD "-субпопуляций, было обнаружено, что эти субпопуляции идентичны [85, 87]. Действительно, как было продемонстрировано с помощью метода селезеночных колоний, крайне высокая чувствительность к индукции толерантност ...]]> Професор Mon, 03 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/03/tolerantnost_oposredovannaya_retseptorom.html http://mimnotes.info/2008/03/02/rol_antigena.html Хотя описанные механизмы, обеспечивающие избирательность локализации лимфоцитов, действуют независимо от антигена, введение антигена может оказывать существенное влияние на перемещение этих клеток. Одно из наиболееранних проявлений воздействия антигена, наблюдаемое в первые часы после стимуляции, сводится к увеличению кровотока через стимулированную ткань [54, 55]. Ток крови в месте локального воспаления в коже или в стимулирован-ном лимфатическом узле может возрасти в 10—25 раз по сравнению с нормаль-ным уровнем — в результате сильно увеличивается и количество лимфоцитов, движущихся через воспаленную область. Некоторые антигены еще больше увеличивают накопление лимфоцитов, вызывая временную задержку их выхода из стимулированных лимфатических узлов (см. обзор [55]). В течение 5—7 дней после антигенной стимуляции размер лимфатического узла может увеличиться в 15 раз, что, вероятно, в значительной степени обусловлено измененным движе-нием лимфоцитов. Не исключено, что такое неспецифичес ...]]> Професор Sun, 02 Mar 2008 22:10:22 +0300 http://mimnotes.info/2008/03/02/rol_antigena.html